植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA試劑盒說明書?

　　TZXD-4938   植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述?

　　檢測原理?：采用雙抗體夾心法(ELISA)檢測樣本中RuBisCO含量，通過HRP酶催化底物顯色，顏色深淺與目標物濃度正相關(guān)。

　　適用樣本?：植物組織勻漿、葉片提取液、細胞裂解液等。

　　檢測范圍?：通常為0.1–50 ng/mL(不同品牌可能略有差異)。

　　二、試劑盒組成?

　　組分 規(guī)格(96T) 保存條件

　　包被微孔板 12孔×8條 2–8℃干燥

　　RuBisCO標準品 0.3 mL×6管(濃度梯度) -20℃長期保存

　　HRP標記檢測抗體 10 mL×1瓶 避光2–8℃

　　TMB顯色液 A/B液各6 mL 避光2–8℃

　　終止液 6 mL×1瓶(2M H?SO?) 室溫

　　20×洗滌緩沖液 25 mL×1瓶(需稀釋) 2–8℃

　　(注：48T規(guī)格用量減半)

　　三、操作步驟?

　　樣本制備?

　　植物組織：按質(zhì)量比1:5–1:10加入PBS勻漿，1000×g離心20分鐘取上清。

　　避免使用含NaN?的緩沖液(抑制HRP活性)。

　　檢測流程?

　　步驟1?：加入標準品或樣本(100 μL/孔)，37℃孵育1小時。

　　步驟2?：洗滌5次(每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干)。

　　步驟3?：加入HRP標記抗體(50 μL/孔)，37℃孵育30分鐘。

　　步驟4?：再次洗滌，加入TMB顯色液(各50 μL/孔)，避光反應(yīng)15分鐘。

　　步驟5?：加入終止液(50 μL/孔)，立即用酶標儀測定450 nm OD值。

　　結(jié)果計算?

　　以標準品濃度對數(shù)與OD值繪制標準曲線，回歸方程計算樣本濃度。

　　四、注意事項?

　　質(zhì)量控制?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%，標準曲線R2≥0.99。

　　保存條件?：未開封試劑盒2–8℃保存6個月;開封后標準品及抗體需-20℃保存。

　　干擾因素?：高色素樣本(如葉綠素)可能需額外離心或稀釋。

　　五、技術(shù)參數(shù)?

　　靈敏度?：通?！?.1 ng/mL。

　　特異性?：不與植物其他羧化酶交叉反應(yīng)。

　　價格范圍?：48T約1200–1980元，96T約1800–3000元。

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