產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

     Profusion™ DNA Polymerase 是一款超高保真 DNA 聚合酶，其采用蛋白融合技術(shù)且具有通用引物退火功能。它是一款融合到持續(xù)合成能力增強(qiáng)域的火球菌屬樣校正 DNA 聚合酶，使 Profusion™ DNA 聚合酶產(chǎn)生具有高準(zhǔn)確度、靈敏度和抑制劑耐受性的 PCR 序列。 該酶具有 5’→3’DNA 聚合酶活性和 3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是 Taq DNA 聚合酶的 100倍。 酶溶液中添加了延伸因子使得該酶具有長片段擴(kuò)增能力，擴(kuò)增速度達(dá)到 15-30sec/kb ，擴(kuò)增目的片段的長度可長達(dá) 20 kb。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化緩沖液，添加了 PCR 增強(qiáng)組分，使得該酶適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。

產(chǎn)品組分

產(chǎn)品應(yīng)用

1.高保真 PCR

2.基因克隆

3.生成測(cè)序模板

4.高 GC 含量 PCR

5.長片段 PCR（長達(dá) 20 kb）

6.突變

7.高通量 PCR

活性定義

用活性化的大馬哈魚精子 DNA 為模板/引物， 74℃ ，30 min 內(nèi)，攝入 10 nmol 的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為 1 U。

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。

DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶

推薦PCR反應(yīng)體系（冰盒上配制）

【注】

1）試劑使用：使用前請(qǐng)充分融解和混勻。

2）聚合酶濃度：推薦使用 1 U/50 μL，可以在 0.5-2 U/50 μL 之間進(jìn)行優(yōu)化，不要超過2 U/50 μL。

3）聚合酶添加：高保真酶有 3’→5’外切酶活性，可能會(huì)降解引物，配制反應(yīng)體系時(shí)，酶應(yīng)該在最后添加。

4）Mg²⁺終濃度： 體系終濃度為 1.5 mM。如有特殊需要，可用 50 mM MgCl₂，以 0.2-0.5 mM 為間隔向上摸索。

5）高 GC 模板： 高GC含量的片段擴(kuò)增時(shí)，體系中加入終濃度為 3%的 DMSO 有利于擴(kuò)增，可明顯的提高擴(kuò)增的效率。

不同模板的推薦使用量（50 μL 反應(yīng)體系）：